細胞簡介：

產(chǎn)品名稱 小鼠海馬神經(jīng)元細胞

組織來源 腦海馬體

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠海馬神經(jīng)元細胞分離自海馬體；海馬體（Hippocampus），又名海馬回、海馬區(qū)、大腦海馬，海馬體主要負責(zé)記憶和學(xué)習(xí)。海馬神經(jīng)元細胞是海馬區(qū)的主要細胞組成，主要功能是參與近期記憶、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié)、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng)，在學(xué)習(xí)、記憶、情緒反應(yīng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細胞聚集區(qū)，具有高度序化板層結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元相對獨立分布的特點，境界相對清晰，便于取材，因此，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究者當(dāng)做理想的實驗?zāi)Ｐ汀：ｑR神經(jīng)元細胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細胞生物學(xué)特性和外源干擾因素作用（細胞因子）的有效細胞模型，其在神經(jīng)生物學(xué)，發(fā)育生物學(xué)體外實驗研究中已被廣泛應(yīng)用。

方法簡介 實驗室分離的小鼠海馬神經(jīng)元細胞采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的小鼠海馬神經(jīng)元細胞經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品信息：

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、 多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×） 、PBS 、培養(yǎng)基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）

培養(yǎng)基： 小鼠海馬神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基(含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 神經(jīng)元細胞樣

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液： 0.125%

小鼠海馬神經(jīng)元細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數(shù)生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養(yǎng)上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養(yǎng)基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數(shù)100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮?。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續(xù)梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養(yǎng)?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養(yǎng)基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養(yǎng)?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質(zhì)細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標(biāo)記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標(biāo)志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術(shù)檢測細胞電特性（如鈉電流）。