細胞簡介：

產品名稱 兔嗅上皮細胞

組織來源 嗅上皮組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 兔嗅上皮細胞分離自嗅上皮組織；嗅上皮細胞是鼻腔的嗅區黏膜的種特殊的感覺性上皮細胞，嗅上皮細胞為棱形雙極細胞，每個細胞表面為細長的嗅毛，突出于嗅區黏膜上皮細胞表面，而細胞的另端為突，常匯成多數細微的嗅絲，組成嗅神經通向顱內。這些細胞的特殊結構，是嗅覺功能的重要組成部分。

方法簡介 實驗室分離的兔嗅上皮細胞采用膠原酶-聯合消化法結合神經元專用培養基培養、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的兔嗅上皮細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1×）或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1 mg/mL） 、PBS 、培養基

包被條件： 鼠尾膠原Ⅰ（2-5 μg/cm2）

培養基： 兔嗅上皮細胞培養基(基礎培養基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 上皮細胞樣

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 屬于高度?綜?

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

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操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。