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ARTICLES商品屬性:

產品名稱 | 兔微血管周細胞培養 | 英文名稱 | Rabbit Microvascular Pericytes |
產品規格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X8447 |
產品信息:

產品名稱 兔微血管周細胞
組織來源 微血管組織
產品規格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 兔微血管周細胞分離自微血管組織;周細胞(pericyte)又稱Rouget細胞和壁細胞,是種包圍全身毛細血管和靜脈中內皮細胞的細胞,可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內皮細胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號與內皮細胞進行細胞通訊,監視和穩定內皮細胞的成熟過程。此外,周細胞還具有調控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點之,所以對血管周細胞的生物學特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料。周細胞產生手指狀的外延以調控毛細血管的血流量。周細胞和內皮細胞之間共同擁有個基膜,基膜上有多種細胞連接,包括多種整合素、神經鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調控;毛細血管受損時,周細胞還可增殖,分化為內皮細胞和成纖細胞。
方法簡介 實驗室分離的兔血管周細胞采用膠原酶-聯合消化法及不銹鋼網篩過濾法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質量檢測 實驗室分離的兔微血管周細胞經alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:

自備試劑: 0.25% 、 多聚-L-賴溶液(1×)或多聚-L-賴溶液(10×) 、PBS 、培養基
包被條件: PLL(0.1 mg/mL)
培養基: 兔微血管周細胞 培養基(基礎培養基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細胞形態: 成纖細胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳2-3代
消化液: 0.25%
原代細胞培養步驟:

取材與預處理?:取新生24小時內Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養基,37℃、5% CO?培養,24小時后換液?。
培養方法?:

原代細胞培養?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養皿。
37℃、5% CO?培養,24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養。
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