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產(chǎn)品中心

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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T牡蠣皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

牡蠣皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品簡介

牡蠣皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。

更新時間:2020-09-30
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:351
產(chǎn)品型號:50T
詳細(xì)介紹在線留言

【產(chǎn)品名稱】牡蠣皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Ostreid herpesvirus(OsHV)
【產(chǎn)品編號】YSP7039
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測,所用儀器為實(shí)時熒光PCR儀,可通過實(shí)時擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時熒光PCR技術(shù),針對鴨源性成分核酸序列設(shè)計特異性引物和熒光探針,通過實(shí)時熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
牡蠣皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
99%5g25g1羥基2基蒽醌7365459alkaline phosphatase

利莫那班羧 質(zhì)量規(guī)格:>98% Rimonabant carboxylic acid

氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 BPIFB1 / LPLUNC1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)

MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit  人髓樣分化子初次應(yīng)答基88CAS號:104517966 鯊烯合酶檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒3095952

98%250mg100g1羥基2基蒽醌1132612basic fibroblast growth factor 9

 人黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:MV3

氨基端前鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*250(g)

Ifi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit  人干擾素活化基205CAS號:104376796抗性淀粉檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒30964002

長梗冬青苷; 具棲冬青甙; 長梗冬青甙鈣熒光探針Fluo3, AM  5mg

尼可占替諾(煙占替諾)  英文名稱:Xantinol nicotinate (xanthinol nicotinate)   保存:-20℃   規(guī)格:100mg 環(huán)指蛋白180抗體

AAT(Alpha1Antitiypsin)  α1抗胰蛋白酶(抗原)*谷氨合成酶檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒4940118

棘苷鈣熒光探針Fluo3, AM  5mg

金石蠶苷  英文名稱:Jinshi silkworm glycoside   保存:-20℃   規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 小細(xì)胞跨膜糖化蛋白抗體

FPP(Fertilization Promoting Peptide)  受精促進(jìn)肽進(jìn)口、分裝趨化子CC基元配體15檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒4940118

5,6,7,3',4'五基黃BAPTA四鈉鹽5mg

植鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Phytic acid dodecasodium salt hydrate 3% NaC1鳥氨脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

多肽產(chǎn)品  多肽產(chǎn)品進(jìn)口、原裝L乳脫氫酶A鏈檢測試盒500gHuman/人Elisa試盒4940390
牡蠣皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒大豆皂苷Ab CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

25氧澤瀉A CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

菜油甾 CAS號: 474624 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

24酰澤瀉F CAS號:  規(guī)格: HPLC≥97%;5mg 訂購|咨詢

澤瀉B CAS號: 18649939 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

25脫水澤瀉A;澤瀉G CAS號: 155521463 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

澤瀉F CAS號: 155521452 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

青 CAS號: 80286584 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

黃芪中分離物 CAS號: 215776786 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢

(3β,6α,16β,20R,24S) CAS號: 1324005517 規(guī)格: HPLC≥97%;5mg 訂購|咨詢

異黃芪皂苷II CAS號: 86764116 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

異黃芪皂苷I CAS號: 84676880 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

8姜 CAS號: 36700455 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

23酰澤瀉C CAS號: 26575939 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

麥冬高黃A CAS號: 74805906 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

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