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原代細(xì)胞
豬原代細(xì)胞
YS-01X8554豬脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞品牌





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 豬脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞品牌 | 英文名稱 | Porcine Spinal Cord Astrocytes |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X8554 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 豬脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞
組織來源 脊髓組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 豬脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自脊髓組織;脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù);是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有個(gè)H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動(dòng)的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細(xì)胞,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和個(gè)有明顯核仁的核。些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動(dòng),突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。
方法簡介 實(shí)驗(yàn)室分離的豬脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞采用消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實(shí)驗(yàn)室分離的豬脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 豬脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 梭形、多角形
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳2-3代
消化液: 0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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