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ARTICLES商品屬性:

產品名稱 | 人成骨細胞品牌 | 英文名稱 | Human Osteoblast Cells |
產品規格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7358 |
產品信息:

產品名稱 人成骨細胞
組織來源 顱骨組織
產品規格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 人成骨細胞分離自顱骨組織;顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結,起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結構,構成面部的支架,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域,分泌酸性物質溶解礦物質,分泌消化骨基質,形成骨吸收陷窩;其后,成骨細胞移行至被吸收部位,分泌骨基質,骨基質礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎,也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。
方法簡介 實驗室分離的人成骨細胞采用先用短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質量檢測 實驗室分離的人成骨細胞經ALP染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養基
培養基: 人成骨細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長特性: 貼壁
細胞形態: 梭形、多角形
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液:0.25%
原代細胞培養步驟:

取材與預處理?:取新生24小時內Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養基,37℃、5% CO?培養,24小時后換液?。
培養方法?:

原代細胞培養?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養皿。
37℃、5% CO?培養,24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養。
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