細胞簡介：

產品名稱 大鼠棕色脂肪細胞

組織來源 脂肪組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 大鼠棕色脂肪細胞分離自棕色脂肪組織；動物體內存在棕色和白色兩種脂肪，白色脂肪堆積在皮下，負責儲存多余熱量；棕色脂肪負責分解引發肥胖的白色脂肪，將后者轉化成二氧化碳、水和熱量，本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色，其特點是組織中有豐富的毛細血管，脂肪細胞內散著許多小脂滴，線粒體大而豐富，核圓形，位于細胞，這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少，新生兒及冬眠動物較多，在新生兒主要分布在肩胛間區、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發揮作用，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫。隨著年齡增長，棕色脂肪會逐漸消失。終，動物體內只殘存少量棕色脂肪細胞，分布于頸部和鎖骨。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色（棕色）脂肪細胞，常呈白色，在嬰幼兒期大量增殖，到青春期數量達到，此后數量一般不再增加。細胞內含有大量富含脂肪的小泡，稱為脂質泡，富含光面內質網。此外，還有一種褐色脂肪細胞，在動物體內主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍，含有高度團縮的褐色脂肪，作用是將脂質分解產熱，調節體內脂質比例。

方法簡介 實驗室分離的大鼠棕色脂肪細胞采用膠原酶-聯合消化法獲得前脂肪細胞，經成脂誘導培養基誘導培養制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠棕色脂肪細胞經油紅O定性檢測陽性，成脂染色數占比>60%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、 多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×）  、PBS  、培養基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）

培養基： 大鼠棕色脂肪細胞培養基(基礎培養基，含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 梭形、多角形、圓形

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：0.25%

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。