商品屬性：

產品信息：

產品名稱 大鼠眼動脈平滑肌細胞

組織來源 眼動脈

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 眼動脈是眼眶及內容物主要的血液供應，是頸內動脈主要分枝，也是交通顱內外血管的重要通道。有研究結果認為，絕大多數眼動脈起源于ICA剛出海綿竇處，且多數起源于ICA床突上段內上壁，少數起源于上壁，少數眼動脈可起源于ICA海綿竇段及腦膜中動脈。眼動脈的走行分為顱內段、管內段及眶內段，眼動脈在管內段一般行走于視神經上方，顱內段和眶內段再分為五段：1、短臂；2、A角；3、長臂；4、B角；5、遠側部。眼動脈進入眶內后沿視神經向下外側走行，終止于眶孔的上內側角。眼動脈的分枝一般分為眼組、眶組及眶外組。眼組分為視網膜動脈睫前動脈及眼球的脈絡叢；眶組分為淚腺動脈和肌動脈；眶外組分為篩后動脈、篩前動脈、眶上動脈、瞼內側動脈、鼻背動脈（終末枝）。眼動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。眼動脈供應整個眼球、眼球附屬器及部分附近組織的營養。眼動脈可發生痙攣、血栓、栓塞及出血等，均可嚴重影響視力。頸內動脈眼動脈瘤簡稱眼動脈瘤，又稱床突旁動脈瘤或頸內動脈腹側動脈瘤。眼動脈瘤是位于眼動脈和后交通動脈之間的動脈瘤，占全部顱內動脈瘤的0.47%-9.26%，30%-70%患者表現為SAH，1/3有視功能損傷，如視力減退、視野缺損和視神經等。體外培養的眼動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介 實驗室分離的大鼠眼動脈平滑肌細胞采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠眼動脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養基

培養基： 大鼠眼動脈平滑肌細胞培養基(基礎培養基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 成纖維細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3代左右

消化液：0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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