培養(yǎng)細胞株一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。如果污染細胞價值不大，宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室，復(fù)蘇或重新購置細胞，再培養(yǎng)。

若污染細胞價值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。

一、細菌和真菌的清除

1、使用抗生素

抗生素對殺滅細菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時，再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期有效。

二、支原體的清除

1、用MRA處理

用MRA(Mycoplasma Removal Agent)處理細胞，每4天換一次液,連續(xù)處理15天以確保細胞純潔健康，效果好.

2、用清洗純化法清除支原體污染的方法

細胞營養(yǎng)馴化→細胞群的篩選→細胞清洗→反復(fù)離心洗滌

其原理是利用離心力、細胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達到清除支原體的目的。由于支原體個體小且除發(fā)酵支原體外多為細胞外寄生,所以通過反復(fù)洗滌細胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數(shù)量降低限。

如結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用，可達到更好的效果。

3、藥物輔助加溫處理

先用藥物處理后，再將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時，可殺死支原體，但對細胞有不良影響。

4、細胞株使用支原體特異性血清

用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染，因特異抗體可抑制支原體生長，故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性，并且5個月后仍為陰性。但此法比較麻煩，不如用抗生素方便、經(jīng)濟。

5 x 10^5 cells/vial 人毛囊角質(zhì)細胞 HHFK

5 x 10^5 cells/vial 人淋巴內(nèi)皮細胞 HLEC

5 x 10^5 cells/vial 人淋巴成纖維細胞 HLF

5 x 10^5 cells/vial 人扁桃體上皮細胞 HTEpiC

5 x 10^5 cells/vial 人口腔角質(zhì)細胞 HOK

5 x 10^5 cells/vial 人牙齦成纖維細胞 HGF

5 x 10^5 cells/vial 人牙周膜成纖維細胞 HPLF

5 x 10^5 cells/vial 人食道平滑肌細胞 HESMC

5 x 10^5 cells/vial 人食道上皮細胞 HEEpiC

5 x 10^5 cells/vial 人胃平滑肌細胞 HGSMC
細胞株